• COMET
  • COMET

COMET

Görüntüleme sistemleri
Katalog No :

Comet Assay / Foci

Single Cell Based DNA Damage Analysis

https://metasystems-international.com/en/products/solutions/comet-foci/

Günümüzde toksikologlar ve radyasyon biyologları, DNA hasarını değerlendirmek için yerleşik birçok test arasından seçim yapabilir. Bununla birlikte, bu testlerin çoğu, yalnızca orijinal lezyonla dolaylı olarak ilişkili olan olayların sayılmasına dayanmaktadır. Örneğin, kromozomal anormallikler ve mikro çekirdekler , DNA kırılmalarından kaynaklanır, ancak mikroskobik olarak görülebilen yapı, karmaşık hücresel işlemlerin sonucudur. Comet tahlili ve γ -H2AX odak analizi, hasarı doğrudan tek bir hücre düzeyinde değerlendirme şansına sahiptir. Toksikoloji portföyünün bir parçası olarak MetaSystems, Metafer yazılımı tarafından yönetilen akıllı tarama iş akışlarında her iki testi de otomatikleştirdi.

 

KUYRUKLU YILDIZ TAHLİLİ

Comet (tek hücre jel elektroforezi) tahlili, tek hücrelerin DNA parçalanma miktarını elde etmek için bir yöntemdir. Kimyasalların veya radyasyonun neden olduğu DNA hasarını tahmin etmek için, örneğin kanser hastalarında iyonlaştırıcı radyasyona karşı bireysel hassasiyetleri test etmek için yaygın olarak kullanılır. Tahlil, bir agaroz jelde parçalanmış DNA'nın neden olduğu göç modelinin görüntü analizini içerir. DNA ne kadar çok parçalanırsa, DNA parçaları o kadar çok göç ederek bir kuyruklu yıldızın kuyruğunu andıran bir yapı oluşturur. Daha sonra hasar ölçümü, 'kafa' (gerçek hücre) ve 'kuyruk' (geçirilen parçalar) hesaplamasına dayalıdır.

Metafer ile akıllı tarama iş akışıCometScan paketi, tek hücreli jel elektroforez numunelerindeki hücreleri otomatik olarak algılar ve seçer. Seçilen tüm hücreler, Comet tahlili için önemli olan tüm özellikler açısından analiz edilir (kuyruk momenti, Zeytin kuyruğu momenti, kuyruktaki %DNA, kuyruk ve baş boyutları ve daha fazlası). Görüntülerdeki arka plan koşulları ölçülür ve sonuç verileri düzensiz arka plan için düzeltilebilir. Kuyruklu yıldızlar, kullanıcı tanımlı morfolojik kriterlere ve hücreler ile arka plan arasındaki eşiklere göre algılanır. Tespit edilen kuyruklu yıldızlar hücre galerisinde görüntülenir ve her kuyruklu yıldızın yeri tek bir fare tıklamasıyla değiştirilebilir. Veriler, tarama ilerledikçe sürekli olarak güncellenen uygun histogramlarda ve/veya dağılım grafiklerinde görüntülenir. Akıllı tarama iş akışı, görüntü alımı için çoklu pozlama sürelerini destekler.

Metafer CometScan, otomatik, yüksek verimli Comet tahlil analizini desteklemek için mükemmel bir yazılımdır. Örneğin çoklu jel numunelerini görüntülemek için farklı boyutlara sahip çeşitli slaytları destekler.

Metafer MetaCyte içindeki sinyal analizi özellikleri kullanılırsa , otomatik hedef hücre seçimi için daha birçok seçenek vardır. Örneğin, böyle bir tarama iş akışı Kirpi Kuyruklu Yıldızlarını otomatik olarak algılayabilir ve sonuçlarını diğer hücrelerden ayırt edebilir.

Yardıma mı ihtiyacınız var?
 

GAMMA-H2AX ODAKLAR

Çift sarmal kopmaları (DSB), onarılmadan bırakılırsa hücrenin hayatta kalması için ciddi sonuçlara yol açabilecek en zararlı DNA lezyonlarıdır. Kromozom anormalliklerine, genomik kararsızlığa ve hücre ölümüne yol açtığı bilinmektedir. DSB indüksiyonunda çeşitli fiziksel, kimyasal ve biyolojik faktörler yer alır. Nükleozom oluşumuna ve dolayısıyla DNA'nın yapısına katkıda bulunan bir protein olan histon H2AX, DSB'lerin oluşumuna bir reaksiyon olarak serin 139 üzerinde fosforile olur ve daha sonra γ -H2AX olarak adlandırılır. γ -H2AX, DSB bölgesinden büyük bir mesafeye genişlediğinden ve spesifik γ -H2AX antikorları mevcut olduğundan , DSB'ler ayrı odaklar olarak görselleştirilebilir. γ miktarının belirlenmesi-H2AX odakları, iyonlaştırıcı radyasyon dahil olmak üzere farklı toksik maddelerin genotoksik etkisini tespit etmek için kullanılabilir.

γ -H2AX odakları mikroskobik olarak nokta şeklindeki sinyaller gibi göründükleri için Metafer MetaCyte'daki sinyal sayma işlevi kullanılarak otomatik olarak analiz edilebilirler . Bununla birlikte, FISH lekelerinin aksine, γ-H2AX odaklarının boyutu değişkenlik gösterme eğilimindedir ve ayrıca daha yüksek dozlarda bir DSB indükleyici ajana maruz kalan hücrelerde daha büyük floresan lekeleme yamaları halinde kaynaşma eğilimindedir. Metafer MetaCyte modülü, hücre çekirdeğindeki odakları doğrudan ve otomatik olarak sayar, ancak ölçüme bir tartım terimi ekleme imkanı da sunar Böylece puanlama koşullarının kendi puanlama standartlarına uyarlanmasına olanak sağlar. Adaptasyon, geçerli doz-etki eğrileri ile doğrulama deneylerinden elde edilen veriler kullanılarak yapılabilir.